Олексин - защита от злокачественных новообразований, антиоксидант, иммуномодулятор, адаптоген, защита от стресса, гарант здоровья и долголетия.

Олексин - это недорогое, но эффективное средство при заболеваниях органов дыхания, пищеварения, простаты, сердечно-сосудистых, гинекологических заболеваниях. У онкобольных с запущенными формами опухолей 3-4 стадии, с рецидивами после оперативных вмешательств, при неоперабельности, после лечения Олексином наблюдаются ремиссии до 5-7 лет.

Олексин - Награжден Золотой медалью им. И.И. Мечникова "За практический вклад в укрепление здоровья нации" за подтвержденный противоопухолевый, антиоксидантый, адаптогенный, антистрессовый, иммунотропный эффект.

Награжден Золотой медалью Пауля Эрлиха за особые заслуги в частной и социальной медицине Европейской комиссией по оценке эффективности БАД за подтвержденный эффект "Олексина".

Биологически активная добавка к пище "Олексин" при одновременном антиоксидантном, иммуномодулирующем и адаптогенном действии, защитит Вас от стресса и заболеваний, в том числе злокачественных новообразований, и гарантирует ВАМ здоровье и молодость на долгие годы.

Олексин - состав: водный экстракт листьев персика обыкновенного.
Важным свойством "Олексина" является его способность ограничивать действие стресса и токсических веществ, приводящих к выраженным нарушениям иммунитета.

Профилактический прием "Олексина" в течение нескольких дней до стрессорного воздействия (и/или воздействия веществ с токсическими свойствами) способствует полному сохранению функциональной активности иммунной системы.

Сочетание "Олексина" со спирулиной делает эти таблетки особо уникальными, так как позволяет получить хорошие результаты при лечении большого спектра заболеваний, в том числе при онкологии, хронических воспалительных заболеваний.

БАД Олексин Награжден Золотой медалью им. И.И. Мечникова "За практический вклад в укрепление здоровья нации" за подтвержденный противоопухолевый, антиоксидантый, адаптогенный, антистрессовый, иммунотропный эффект.

Награжден Золотой медалью Пауля Эрлиха за особые заслуги в частной и социальной медицине Европейской комиссией по оценке эффективности БАД за подтвержденный эффект "Олексина".

БАД "Олексин" - средство, обладающее иммуномодулирующим, антиоксидантным, противоопухолевым и адаптогенным действиями, которое может быть использовано для лечения и профилактики вторичных иммунодефицитных состояний и как общеукрепляющее средство.

Сущность нового препарата состоит в том, что он содержит сухой экстракт листьев или листьев и цветков персика обыкновенного (Persika vulgaris mill), биологически активные компоненты в эффективном количестве и наполнитель, взятые в определенном пропорциональном соотношении.

Комплексное изучение биологических свойств препарата показало, что сухой экстракт листьев или листьев и цветков персика не обладает токсичностью, мутагенностью, эмбриотоксичностью, тератогенностью, не проявляет аллергенных свойств, т.е. он является безвредным средством и может быть рекомендован для длительного, ежедневного использования.

Исследования в институте биохимической физики Российской Академии наук (Москва) показали, что он обладает выраженной антиоксидантной активностью.

Важным свойством экстракта является его способность оказывать противоопухолевое действие. Исследования на лабораторных животных показали, что профилактическое введение экстракта в течение 10 дней до прививки опухоли (аденокарциномы молочной железы) приводило к последующему торможению роста опухоли, а у части животных опухолевый процесс совсем не развивался, тогда как в контрольной группе опухоль развивалась у всех животных.

Обладая выраженной антиоксидантной активностью и иммуностимулирующими свойствами, экстракт осуществляет противоопухолевую защиту организма.

Клинические испытания биопрепарата "Олексин" показали высокую эффективность применения, за что имеет признание и заслуженные награды. Его уже знают и любят не только в России, но и за рубежом. Он входит в число 140 биологически активных добавок, которые внесены РАЕМН в Справочник биопрепаратов, приносящих эффективный результат по их применению.

Предлагаем Вам прочитать статьи об успешном использовании в медицинской практике Биологически Активной Добавки, натурального препарата Олексин.

В настоящее время уделяется внимание растительным веществам фенольной природы. Общеизвестны такие флавоноидсодержащие лекарственные растения как солодка, календула, бессмертник, софора японская, зверобой, а также березовый гриб чага, обладающие антиоксидантной, иммуномодулирующей, адаптогенной, противоопухолевой активностями. Большое количество высокоактивных соединений фенольной природы, прежде всего флавоноидов, идентифицировано в листьях, цветках и стеблях персика обыкновенного. В медицине Древнего Китая, Кореи и Средней Азии персиковое дерево почиталось как символ долголетия и ценилось наряду с женьшенем.

Биологически активная добавка к пище БАД «Олексин» разработана на основе экстракта из листьев персика обыкновенного и включает в себя 45 природных полифенольных соединений.

В проведенных ранее исследованиях нами показана полная безвредность препарата, отсутствие у него мутагенной, аллергенной, тератогенной активностей и эмбриотоксичности. В НИИ экспериментальной диагностики и терапии опухолей онкологического научного центра им. Н.Н. Блохина РАМН проведена оценка противоопухолевой активности препарата «Олексин». Профилактическое пероральное введение олексина в течение 10 дней до прививки опухоли аденокарциномы молочной железы Са-755 мышам приводило к торможению роста опухоли, при этом, у каждой пятой мыши опухоль не развивалась вообще.

В институте биологической химии им. Н.М. Эмануэля российской академии наук проведена оценка антиоксидантной активности, которая показала, что препарат «Олексин» обладает выраженной антиоксидантной активностью. «Олексин» обладает ярко выраженным адаптогенным действием (повышает работоспособность, устойчивость организма к неблагоприятным факторам окружающей среды, снижает болевую чувствительность). Потомство самок крыс, получавших препарат в течение всего срока беременности, достоверно превосходило по всем оцениваемым показателям контрольных животных.

Исследования иммунобиологических свойств препарата «Олексин» были проведены в соответствии с требованиями МЗ РФ к лекарственным препаратам и МУК 2.3.2.721-98 «Определение безопасности и эффективности биологически активных добавок к пище».

Растительный препарат полифенольной природы «Олексин» обладает ярко выраженной способностью стимулировать все звенья иммунной системы: фагоцитоз, клеточный и гуморальный иммунный ответ.

В 1999 г. препарат «Олексин» (капли) был зарегистрирован в качестве биологически активной добавки к пище.
Далее было разработано драже «Олексин», содержащее кроме экстракта из листьев персика витамин С в концентрации 50 мг. Затем разработаны таблетки «Олексин со спирулиной», включающие 4 компонента:

1. экстракт из листьев персика (Олексин);
2. порошок биомассы микроводоросли спирулины, служащий источником природных аминокислот (в том числе 8 незаменимых), витаминов и микроэлементов, пищевых волокон;
3. бетакаротин, выделенный из моркови;
4. микрокристаллическую целлюлозу.

Поскольку Олексин, спирулина и бетакаротин содержат вещества антиоксидантной природы, то комплекс «Олексин со спирулиной» проявляет более высокую антиоксидантную активность, чем каждый компонент в отдельности.

В 2002-2003 гг. была проведена регистрация таблеток и драже в качестве биологически активной добавки к пище.

Клиническая оценка БАД «Олексин», БАД «Драже Олексин», БАД таблетки «Олексин со спирулиной» проведена с участием 25 онкобольных, 86 женщин с гинекологическими заболеваниями, 28 больных с туберкулезом и 67 часто болеющих детей.

У всех онкобольных с различными стадиями и локализацией опухолевого процесса через 1 месяц приема олексина (по 5-7 капель 3 раза в день) качество жизни достигло 1-го уровня по классификации ВОЗ.

При гинекологических заболеваниях у женщин после 3-5 месяцев приема БАД «Олексин» в виде капель (4-7 капель 3 раза в день) и таблеток для рассасывания (по 1 таблетке 3 раза в день) практически исчезли все признаки фиброзно-кистозных мастопатий, аденомиоза, нарушений менструального цикла и отмечается регресс миомы матки.

Клиническая оценка БАД «Олексин» с участием детей в возрасте от 2,5 до 14 лет показала, что у детей, принимавших олексин в виде капель или драже в течение 2-3 недель (по 1-4 капли или по 1-2 драже 3 раза в день), достоверно повышались показатели иммунной системы, в частности фагоцитарной активности и показатели красной крови, особенно гемоглобин.

Клиническая оценка применения БАД «Олексин при лечении больных туберкулезом органов дыхания показала, что данный препарат уменьшает частоту развития побочных реакций на прием химиопрепаратов, улучшает их переносимость; восстанавливает Т-клеточный иммунитет; позволяет в целом улучшить результаты лечения.

Аллергических реакций и признаков индивидуальной непереносимости препарата во всех клинических испытаниях отмечено не было.

Таким образом, БАД «Олексин» является эффективным средством, проявляющим противоопухолевое, иммуномодулирующее, адаптогенное, антиоксидантное действие, совершенно безвреден и может быть рекомендован для применения в качестве лечебного и профилактического средства в педиатрии, онкологии, фтизиатрии и гинекологии.

Введение:
Неуклонный рост заболеваемости злокачественными новообразованиями ведет к увеличению частоты распространенных форм рака различных локализаций. При этом более половины онкологических больных, нуждающихся в паллиативной помощи, страдают целым рядом таких мучительных симптомов, как слабость, боли, одышка, нарушение сна, отсутствие аппетита, тошнота, рвота и т.д., что значительно снижает качество жизни пациентов. Традиционные неудачи симптоматической терапии связаны с отсутствием патогенетических подходов к коррекции нарушений гомеостаза, развивающихся в процессе прогрессирования злокачественных новообразований. Нарастающий синдром эндогенной интоксикации формирует патологически замкнутые связи, не поддающиеся саморегуляции организма, прогрессивно увеличивая тем самым уровень эндотоксикоза.

Поэтому, разработка и внедрение в практику эффективных, хорошо переносимых и безопасных методов коррекции нарушений гомеостаза с целью улучшения качества жизни больных с генерализованными формами злокачественных новообразований, является актуальной задачей.

Цель работы:
Изучить влияние биологически активного препарата «Олексин» на качества жизни больных с генерализованными формами злокачественных новообразований.

Новизна метода:
Новизна разработанного способа заключается в том, что вместо дорогих и инвазивных методов детоксикации организма у онкологических больных, предлагается экономически выгодный и простой способ, позволяющий эффективно улучшить качество жизни больных. Обладая хорошей переносимостью, простотой применения, длительностью лечебного эффекта, «Олексин» стает препаратом выбора при оказании паллиативной помощи пациентам с распространенными формами злокачественных новообразований.

Состояние больных до начала приема «Олексина»
До начала приема «Олексина» у всех 68 (100%) больных были признаки прогрессирования симптомов опухолевой интоксикации, которые проявлялись в различной степени выраженности и зависели от органных нарушений, а также локализации опухоли и распространенности метастазов. Данные проявления преимущественно характеризовались болевыми ощущениями, а также диспепсическими нарушениями и астеновегетативным синдромом.

На фоне болевого синдрома, одними из первых начинали прогрессировать немотивированные и нередко неопределенные диспепсические явления, которые возникали после приема пищи, сопровождающиеся чувством тяжести в эпигастрии или правом подреберье, слабостью, тошнотой, отвращением к пище, «метеоризмом», периодически у больных возникали запоры. На этом фоне, нарастала прогрессирующая слабость, снижение двигательной (физической) активности, ухудшение общего самочувствия и настроения, большинство больных жаловались на «плохой» сон и раздражительность.

Выраженность болевых ощущений зависела от локализации опухоли и распространенности метастатических поражений лимфоузлов. В 8 (11,7%) случаях интенсивность болей была выражена и возникла необходимость назначения сильных (наркотических) анальгетиков. В остальных случаях 60 (88,3%) больные получали противовоспалительные анальгезирующие препараты, а также седативные средства.

Состояние больных после применения «Олексина»
Все 68 больных дополнительно к проводимой паллиативной терапии получали БАП «Олексин» (Препарат «Олексин» создан многолетними усилиями коллектива ученых и врачей России, в последующем оригинальная биотехнология приготовления препарата разработана на Пермском НПО «Биомед» - патент №2132197 от 27.06.99), в дозе по 7-10 капель, 3 раза в сутки за 30 минут до еды на ¼ стакана кипяченой воды.

Следует отметить, что терапия проводилась у инкурабельных больных, когда практически были исчерпаны все возможности радикального или паллиативного лечения, или его проведение было противопоказано в связи с крайней степенью тяжести состояния пациента по основному или сопутствующим заболеваниям.
На фоне приема «Олексина», у 45 (66,2%) больных, если не было тяжелых функциональных нарушений (декомпенсированный стеноз и др.) уже на 2 - 3 сутки появлялся аппетит, который усиливался по мере увеличения сроков приема препарата, купировались такие диспепсические нарушения, как тошнота и рвота, исчезало чувство тяжести в эпигастрии.

Но самым главным моментом является то, что уменьшались или прекращались сильные (порой изматывающие больного) боли. Так, если к началу лечения, боли беспокоили практически всех больных (100%), из них наркотические анальгетики принимало 8 человек (11,7%), то спустя 1- 2 месяца после приема препарата, боли уменьшились у 48 (70,5%). Среди группы больных принимавшей наркотические анальгетики осталось принимать 6 человек (8,8%) и то в сниженных дозах (!), а 2 (2,9%) пациентов в связи с полным купированием болей отказались от дальнейшего приема их.

Следует отметить, что на фоне приема «Олексина» у инкурабельных больных возникает так называемый «период ремиссии» (полное купирование болей, диспепсических нарушений и астеновегетативного синдрома до появления новых симптомов заболевания), который возник у 50 больных (73,5%), и только у 18 (26,5%) в связи с крайне тяжелым состоянием не было ни какой реакции. Длительность «периода ремиссии», у 15 (22%) пациентов составил около 2-х лет, у - 18 (26,4%) около 1 года, и менее 1 года у – 35 (51,5%).

Из всех больных с генерализованными формами рака, на первом году жизни после установления диагноза умерло 35 (51,5%) больных, на втором году 16 (24,5%), до настоящего времени живы 15 (24%) пациентов.
Из 15 оставшихся больных, чувствуют себя «хорошо» – 7, «удовлетворительно» – 4, «неважно» - 4. Интересен и тот факт, что в первых двух группах больные не только избавились от отягощающих их состояние симптомов но и живут относительно полноценной жизнью, пациенты первой группы даже набрали вес, который в среднем составил 10±2 кг.

Обсуждение:
Анализ результатов традиционного ведения больных с распространенными формами рака показывает, что практически у всех больных показатели качества жизни сохраняются сниженными, которые быстро прогрессируют, несмотря на проводимую терапию. В значительной мере это связано, не только с нарастанием эндотоксикоза, но и отсутствием патогенетических подходов к коррекции нарушений гомеостаза.
Традиционно существующие формы ведения больных в первую очередь направлены на купирование болевого синдрома, путем назначения сильных наркотических анальгетиков. Но, как показывает практика, болевой синдром у этой группы больных все же продолжает нарастать и для купирования его приходится увеличивать дозы наркотических препаратов, которые усугубляют состояние больного.
Необходимо отметить, что проводимая паллиативная терапия у больных с распространенными формами злокачественных новообразований должна быть малоинвазивной, так как биологический потенциал их ограничен. Во первых, это связано с тем, что бы избежать нежелательных (токсических) эффектов, которые возникают часто после применения химиотерапевтических препаратов, а во вторых чтобы получить пользу от лечения и избавить больного от страданий.

Все больные с распространенными формами злокачественных новообразований должны в полном объеме получать комплексную симптоматическую терапию. Основу ее, по современным представлениям, должны составлять препараты купирующие боли, астеновегетативные и диспептические нарушения и другие тягостные симптомы.

Отличие данного метода ведения онкологических больных, от традиционно бытующего заключено в том, что «Олексин» в первую очередь направлен на устранение явлений эндотоксикоза, а также регуляцию иммунной системы. При этом, «Олексин» проявляет свое воздействие на организм в целом. На этом фоне происходит мобилизация собственных защитных сил, что в какой то мере сдерживает дальнейший рост опухоли или распространение метастазов.

Следует отметить, что онкологические больные с распространенными формами злокачественных опухолей это та масса больных, которую официальная медицина, даже с учетом широкого распространения диспансеризации и методов восстановительного лечения, просто не в состоянии охватить. В то же время, оздоровительные и лечебные воздействия необходимы практически всем, в одном случае для улучшения качества жизни, в другом для продления жизни и предотвращения прогрессирования заболевания.

Выводы:
Использование БАП «Олексин» у больных с распространенными формами злокачественных новообразований позволяет улучшить качество их жизни. Препарат купирует такие явления как астеновегетативный и диспепсический синдром, повышает физическую активность больных, обладает хорошим обезболивающим эффектом (повышает порог болевой чувствительности), в связи с чем значительно снижается доза потребления наркотических анальгетиков или происходит полный отказ от них. Препарат благотворно влияет на нервную систему, нормализуя сон и настроение больных. Увеличивается безрецидивный промежуток жизни больных.

Противопоказаний к применению «Олексина» нет в связи с его хорошей переносимостью, простотой и безопасностью применения. Нельзя не отметить и очевидные достоинства применения «Олексина»:

• экономичность;
  
• практическое отсутствие осложнений и отрицательных эффектов;
  
• простота применения,

что делает его практическое применение целесообразным при оказании паллиативной помощи онкологическим больным.

В летнее время отдых в детских оздоровительных центрах (ДОЦ) является одной из самых массовых и доступных форм организованного отдыха детей. Ежегодно в загородных ДОЦ России отдыхает до 22% детей, в Пермской области от 24% до 38% детей (от общего количества детей, подлежащих оздоровлению) от 6 до 16 лет. Не случайно особая роль в реабилитации отводится летнему отдыху детей, так как летние каникулы составляют значительную часть годового свободного времени детей.

Во время пребывания в ДОЛ дети испытывают воздействие следующего комплекса факторов:

1. Естественные природно-климатические факторы. Как правило, детские оздоровительные комплексы располагаются в экологически чистых зонах;
   
2. Режим дня и двигательная активность – приоритет отдается повышенной двигательной активности с использованием утренней гигиенической гимнастики, ходьбы по пересеченной местности, плаванию в бассейне или в открытых водоемах, спортивным играм (настольный теннис, футбол, волейбол, баскетбол) и практически ежедневных дискотеках;
   
3. Полноценное, сбалансированное 5 – 6 разовое питание;
   
4. Культурно – массовые мероприятия.

Каждый ребенок, попадая в новый для него микросоциум, получает определенную антигенную нагрузку, поэтому соматическое здоровье ок-ружающих, во многом определяет качество оздоровления ребенка в лагере и одним из важных показателей работы ДОЦ является заболеваемость.

Анализ структуры заболеваемости детей за время пребывания в ДОЦ показывает, что лидирующее место отводится острой респираторной патологии и травматизму, следовательно именно на профилактику этих состояний и должны быть направлены основные усилия.

В настоящее время в научной медицинской литературе широко обсуждается вопрос о возможности и эффективности применения иммуномодулирующих препаратов в профилактике ОРВИ в детских организованных коллективах.

Драже «Олексин» - биологически активная добавка к пище, содержащая вещества антиоксидантной природы, выделенные из листьев персика обыкновенного, в частности, полифенолы (флавоноиды, дубильные вещества, кумарины и др.) и порошок биомассы микроводоросли спирулины.

Биологическое действие.
Стимулирует все звенья иммунитета, повышая фагоцитарную активность макрофагов и нейтрофилов, усиливая выработку антител, увеличивая количество Т-лимфоцитов. Обладает антиоксидантной и противоопухолевой активностью. Проявляет адаптогенные свойства, выражающиеся в повышении сопротивляемости организма к воздействиям неблагоприятных экологических, климатических, профессиональных и стрессорных факторов увеличением мышечной и силовой выносливости и повышении порога болевой чувствительности. Устраняет иммунодефицит, вызванный стрессорными и иммуносупрессирующими факторами. Оказывает общеукрепляющее действие, улучшает настроение, сон, аппетит.

Учитывая особенности биологического действия препарата, возмож-ность приема профилактической дозы 1 раз в сутки, отсутствие зарегист-рированных ранее аллергических реакций на компоненты препарата по-зволило выбрать «Олексин» в качестве иммуномодулирующего препарата для применения в условиях ДОЦ.
Нами проведена оценка эффективности оздоровления детей в ДОЦ «Благодать», расположенном с экологически чистом месте Пермского района Пермской области в течение лета 2005 года. В ходе исследования все дети были разделены на две группы: 1 группа (основная) – 124 ребенка получали ежедневно БАД «Олексин» в профилактической дозе, 2 группа (группа сравнения) - 112 детей, отдыхавшие в это же время в ДОЦ и не принимавшие БАД «Олексин». Возраст детей с 10 до 15 лет.

Программа обследования включала в себя бальную оценку параметров, используемых для оценки эффективности оздоровления детей в ДОЦ, т.е. оценку динамики массы тела, динамометрии, экскурсии грудной клетки, спирометрии и заболеваемость.

Результаты.
Изменение массы тела в динамике не выявило существенных изменений между группами. Положительная динамика зарегистрирована у 76 (61,29%) детей основной группы и у 71 (63,39%) детей группы сравнения, в то же время среди детей, принимавших БАД «Олексин», отмечено меньшее число детей с отрицательной динамикой массы тела 36 (29,03%) и у 38 (33,93%) – группы сравнения (p>0,05).

У 79,03% детей основной группы и только у 48,1% детей группы сравнения зарегистрирована положительная динамика со стороны «дыхательных проб» (p<0,05). Положительная динамика жизненной емкости легких и экскурсии грудной клетки зарегистрирована у 63,7% детей основной группы и лишь у 33,9% детей группы сравнения (p<0,05).

Респираторная заболеваемость зарегистрирована в 19,35% случаев среди детей основной группы и в 33,04% - в группе сравнения (p<0,05). Общая заболеваемость 26 (20,97%) случаев среди детей основной группы и 43 (38,39%) детей группы сравнения (p<0,05).

В целом эффективность оздоровления оценивали по комплексной динамике пяти критериев. Выраженный оздоровительный эффект получили 0 (70,97%) детей основной группы и только 57 (50,89%) детей контрольной группы, отсутствие оздоровительного эффекта зарегистрировано у 6 (4,84%) детей первой группы и у 15 (13,89%) детей контрольной группы (p<0,05).

Выводы.
Применение комплексного иммуномодулирующего препарата драже «Олексин» в условиях детского оздоровительного центра, в профилактической дозе способствует увеличению резервов дыхательной системы (p<0,05), силы (p<0,05) и снижению респираторной заболеваемости (p<0,05), что приводит в целом к повышению эффективности оздоровления.

Анализ состояния здоровья детского населения Пермской области свидетельствует о том, что доля абсолютно здоровых детей (с первой группой здоровья) не превышает 10%. Известно так же, что примерно каждый пятый ребенок имеет хроническую патологию. В Пермском районе уровень хронических заболеваний превышает среднеобластной показатель, составляя 219,2 на 1000 против 197 на 1000 в области.

Дошкольный возраст характеризуется повышенной чувствительностью организма ребенка к респираторной вирусной инфекции. С одной стороны, это особенность данного возрастного периода. С другой стороны, при частых ОРВИ не происходит адекватного восстановления функциональных характеристик иммунной системы. Чаще всего иммунная система детей этого возраста не имеет грубых первичных и приобретенных дефектов, но характеризуется крайней напряженностью процессов иммунного реагирования, нарушением межклеточной кооперации и недостаточностью резервных возможностей, что, по-видимому, является результатом длительного и массивного антигенного воздействия на организм ребенка. Безусловно, такое состояние иммунной системы является фактором высокого риска развития осложнений как местных (присоединение бактериального воспаления на различных уровнях респираторного тракта), так и общих (формирование иммунокомплексной и иной иммунной патологии).

В связи с этим обоснованным является совершенствование мероприятий по своевременному выявлению отклонений в здоровье дошкольников, а так же поиск новых доступных возможностей для укрепления защитных сил организма и предотвращения формирования необратимых хронических расстройств.

Целью работы явилось изучение эффективности применения препарата Олексин как средства иммуномодулирующей терапии у детей.

Материалы и методы. В рамках областной целевой программы по иммунореабилитации детского населения Пермской области проводилось обследование детей 2-6 летнего возраста, посещающих детские дошкольные учреждения пос. Юго-Камский Пермского района. Изучалась заболеваемость детей по данным первичной медицинской документации, а так же по сведениям, полученным от родителей путем анкетирования.

Проводилось клинико-лабораторное обследование: гемограмма венозной крови, оценка иммунного статуса с определением относительного и абсолютного количества Е-РОЛ общих, Е-РОЛ активных, Е-РОЛ теофиллинрезистентных, Е-РОЛ теофиллинчувствительных, % фагоцитоза, фагоцитаного числа и индекса, концентрации сывороточных иммуноглобулинов А, М, G по Манчини. Полученные результаты сравнивались с региональными нормативами. Специфический иммунный ответ на инфицирование вирусами простого герпеса изучался методом иммуноферментного анализа (ИФА) с использованием тест-системы «Вектор-Бест». При скрининговом исследовании титры антител выше 1:400 даже при отсутствии эпизодов герпетических высыпаний в анамнезе оценивались, как «угроза активации» и являлись показанием для неспецифической иммунопрофилактики. Общий иммуноглобулин Е определялся методом твердофазного ИФА с оценкой результатов по Б.А. Бабушкину (1984).

Иммуномодулирующие мероприятия назначались с учетом индивидуальных особенностей. Так, дети из группы часто болеющих (острые респираторные заболевания 5 и более раз в год) получали препараты интерферона или его индукторы в сочетании с поливитаминным комплексом и местными бактериальными лизатами с вакциноподобным действием, при наличии герпетических высыпаний в анамнезе дополнительно назначался ацикловир. Была выделена группа из 30 человек, в которой в качестве монотерапии был использован Олексин. Критерии включения в группу: частота заболеваемости не более 4 раз в год, отсутствие эпизодов герпетической инфекции в анамнезе. Препарат назначался по 5 капель натощак 1 раз в день в течение 1 месяца. После лечения проводилось повторное обследование.

Статистическая обработка проводилась помощью программ Exel и Biostat. Определялись показатели описательной статистики, достоверность результатов оценивалась по критерию Стьюдента, а так же непараметрическим методом с использованием критерия Уилкоксона.

Олексин – биологически активная добавка к пище (регистрационное удостоверение № 001333.Р.643.12.99. от 24.12.1999; патент № 2132197 от 27.06.1999), разработанная на основе экстракта из листьев персика обыкновенного и включающая в себя более 45 природных полифенольных соединений. В проведенных ранее исследованиях была показана полная безвредность препарата, отсутствие у него мутагенной, аллергенной, тератогенной активности и эмбриотоксичности. Установлена антиоксидантная способность, а так же адаптогенное действие Олексина, проявляющееся повышением работоспособности, устойчивости организма к неблагоприятным факторам окружающей среды, снижением болевой чувствительности.

Результаты и их обсуждение.
Дети на момент обследования посещали детское дошкольное учреждение, средняя частота перенесенных острых заболеваний в год составила 2,6±0,2 случая на человека. Хроническое заболевание имел 1 ребенок – вторичный пиелонефрит, с функциональными расстройствами сердечно-сосудистой и нервной системы наблюдались 5 человек. Аллергическая патология была диагностирована ранее у 5 детей (респираторный аллергоз, атопический дерматит), однако, аллергические реакции в анамнезе отмечали 14 человек (48% обследованных): кожная сыпь на ряд продуктов и витаминов, двое детей болели с нарушением функции внешнего дыхания в виде одышек. В целом, показатели здоровья в исследуемой группе являлись вполне обычными для этого возраста.

Однако данные объективного осмотра показали, что у каждого второго ребенка отмечалось увеличение небных миндалин 1-2 степени, у каждого четвертого была выявлена значимая гиперплазия регионарных лимфоузлов (второго порядка при «условной норме» - не выше первого порядка). Таким образом, можно было говорить о раздражении лимфоэпителиальной глоточной системы (ЛЭГС), осуществляющей местную противоинфекционную защиту респираторного тракта. Известно, что при выраженной гиперплазии ЛЭГС нарушается лимфоэпителиальный симбиоз, создаются предпосылки для неадекватной стимуляции иммунной системы, преодоления порога ее толерантности, формирования иммунной дисфункции.
Лабораторное обследование показало, что наиболее выраженными изменениями были снижение абсолютного значения Е-РОЛ общих, фагоцитарного числа и дисиммуноглобулинемиея со снижением Ig G.

Общий иммуноглобулин Е был увеличен у 14 детей, средний уровень в группе составил 68,2±132,05 (от 12 до 600 МЕ/мл), что в 3 раза превышает возрастную норму для этого возраста. Аллергические заболевания в анамнезе имели лишь 5 детей, следовательно, фактическая распространенность аллергической предрасположенности по данным клиники и результатов лабораторного обследования была выше более, чем в 2 раза.

Исследование содержания антител (Ig G) к вирусу простого герпеса в сыворотке крови показало, что при отсутствии клинических проявлений герпетической инфекции в анамнезе в этой группе, 8 человек имели тиры 1:400, что оценивалось как «угроза активации» и требовало неспецифических иммунореабилитационных мероприятий.

Лечение Олексином все дети перенесли удовлетворительно, случаев аллергических реакций или других побочных эффектов не выявлено. Было отмечено, что предложенная схема практически легко осуществима в условиях группового лечения в детском учреждении. Однократный прием препарата в удобной дозировке позволяет полностью контролировать выполнимость назначений.

Повторное обследование через месяц после проведенной терапии показало, что лечение Олексином способствовало достоверной положительной динамике ряда сниженных первоначально параметров. При оценке динамики изменения сниженных общих Е-РОК (непараметрическим методом с помощью критерия Уилкоксона) отмечалось из значимое увеличение (W= -93, p<0,02). Аналогичные изменения произошли с уровнем иммуноглобулинов класса G, они повысились у большинства больных (W= -66, p<0,018).

Интересной находкой стала динамика общего иммуноглобулина Е сыворотки крови – его повышенный уровень снижался у 8 из 9 детей в парных наблюдениях (W= 35, p<0,05).

Заключение.
У дошкольников даже в период клинического благополучия и при отсутствии признаков острых инфекционных заболеваний нередко выявляются отчетливые изменения в иммунной системе, которая хотя и не имеет грубых первичных и приобретенных дефектов, но характеризуется напряженностью процессов иммунного реагирования, и недостаточностью резервных возможностей. Применений препарата Олексин способствует нормализации пониженных общих Т-лимфоцитов и иммуноглобулинов класса G, снижает уровень общего иммуноглобулина Е, значительно улучшает фагоцитарную активность лейкоцитов.

Полученные данные позволяют рекомендовать Олексин в качестве иммуномодулирующего средства у детей.

Введение:
Мужское бесплодие является одной из ключевых проблем клинической андрологии и составляет 30 – 40% причин бесплодного брака. За последние годы нарушение репродуктивной функции мужчин, состоящих в бесплодном браке, приобрело особую медицинскую и социальную значимость. Бесплодие у мужчин возникает в результате разнообразных патологических процессов в организме, оказывающих отрицательное воздействие на внутренние органы, эндокринные железы, центральную нервную систему, приводя к дистрофическим изменениям в семенных канальцах и ткани яичка, способствуя при этом развитию патозооспермии, то есть ухудшению оплодотворяющей способности сперматозоидов.

Цель работы:
Изучить влияние биологически активного препарата «Олексин» на оплодотворяющую способность сперматозоидов.

Новизна метода:
Коррекция иммунологических нарушений в сперматогенезе это крайне сложная задача, особенно при проведении контрацептивной или иммунодепрессивной терапии, когда результаты расцениваются как попытки лечения с достаточно низкой эффективностью. Вопросы влияния препаратов с иммуномодулирующими свойствами на оплодотворяющую способность сперматозоидов остаются до настоящего времени не изученными.

Обладая хорошей переносимостью, простотой применения, а также длительностью лечебного эффекта, для изучения вопросов влияния на оплодотворяющую способность сперматозоидов был включен биологически активный препарат «Олексин», который обладает не только антиоксидантными и адаптогенными свойствами, но и хорошими иммуномодулирующими свойствами.

Анализ полученных результатов показывает, что БАП «Олексин» в монотерапии на протяжении 3 месяцев у больных с патозооспермией различной степени тяжести позволяет достоверно увеличить концентрацию сперматозоидов в эякуляте практически в 5 раз (р‹0.05), на этом фоне повышается не только количество живых сперматозоидов, но и нормализуются показатели подвижности сперматозоидов.

В результате проведенной монотерапии, у 1 пациента наступило улучшение показателей эякулята, что способствовало наступлению беременности, все 4 больных из 3 группы (патозооспермия 3 степени) были переведены в 2 группу, а 6 человек из 2 группы (патозооспермия 2 степени) в 1 группу.

Проведенные исследования показывают, что БАП «Олексин» у больных с патозооспермией, позволяет не только улучшить спермограмму но и повысить качество их жизни:

• купирует астеновегетативный синдром;
  
• повышает физическую активность больных;
  
• благотворно влияет на нервную систему, нормализуя сон и настроение больных.

Хорошая переносимость «Олексина», сочетается с простотой и безопасностью применения. Нельзя не отметить и такие очевидные достоинства использования «Олексина», как экономичность, отсутствие осложнений и отрицательных эффектов, простота применения.

Выводы:
Использование БАП «Олексин» в монотерапии на протяжении 3 месяцев у больных с патозооспермией различной степени тяжести позволяет увеличить концентрацию сперматозоидов в эякуляте практически в 5 раз (р‹0.05), а также количество живых сперматозоидов, нормализует показатели подвижности сперматозоидов.

БАП «Олексин» рекомендуется использовать как в монотерапии (для подготовки больных к базисной терапии), так и в комплексной терапии с целью улучшения оплодотворяющей способности сперматозоидов.

• Введение
  
• 1. Изучение иммуномодулирующих свойств БАД «Олексин»
  

  • 1.1. Изучение влияния «Олексина» на первичный иммунный ответ
    
    • 1.1.1. Исследование влияния «Олексина» на количество форменных элементов белой крови и морфометрические показатели тимуса и селезенки мышей при первичном иммунном ответе
      
    • 1.1.2. Изучение влияния «Олексина» на клеточный иммунный ответ
      
    • 1.1.3. Влияние «Олексина» на гуморальный иммунный ответ
      
  • 1.2. Характеристика иммунотропной активности «Олексина» на модели индуцированной циклофосфамидом иммуносупрессии
    
  • 1.3. Характеристика иммунотропной активности «Олексина» на модели глубокой иммуносупрессии
    
  • 1.4. Изучение влияния «Олексина» на фагоцитарную активность макрофагов
    
    • 1.4.1. Влияние «Олексина» на функцию перитонеальных макрофагов и макрофагов селезенки
      
    • 1.4.2. Влияние «Олексина» на функциональную активность макрофагов селезенки на фоне иммуносупрессии
      
  • 1.5. Характеристика влияния «Олексина» на иммунную систему мышей, подвергнутых иммобилизационному стрессу
    
    • 1.5.1. Влияние «Олексина» на гемограмму и морфометрические показатели органов лимфомиелоидной системы мышей, подвергнутых иммобили-зационному стрессу
      
    • 1.5.2. Влияние «Олексина» на фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови мышей, подвергнутых иммобилизационному стрессу
      
    • 1.5.3. Влияние «Олексина» на фагоцитарную активность макрофагов органов лимфомиелоидной системы мышей, подвергнутых иммобилизационному стрессу
      
• 2. Исследование адаптогенной активности БАД «Олексин»
  

  • 2.1. Исследование действия «Олексина» на функциональное состояние двигательного анализатора
    
  • 2.2. Влияние «Олексина» на болевую чувствительность
    
  • 2.3. Изучение влияния «Олексина» на поведенческие реакции
    
• 3. Изучение антиоксидантной и противоопухолевой активностей БАД «Олексин»
  

  • 3.1. Оценка антиоксидантной активности БАД «Олексин» in vitro
    
  • 3.2. Оценка противоопухолевой активности БАД «Олексин»
    
• Заключение
  
  

Введение

В данном отчете представлены материалы по оценке иммуномодулирующей, адаптогенной, противоопухолевой, антиоксидантной активностей биологически активной добавки к пище «Олексин».

Экспериментальное изучение иммуномодулирующей активности «Олексина» проведено в соответствии с требованиями МЗ РФ к лекарственным препаратам и МУК 2.3.2.721-98 «Определение безопасности и эффективности биологически активных добавок к пище». Животные, используемые в экспериментах, содержались в стандартных условиях вивария НПО «Биомед». «Олексин» - биологически активная добавка к пище, парафармацевтик, полученная из листьев персика обыкновенного (Persica vulgaris Mill.) по экологически чистой технологии, обладающая широким спектром фармакологического действия, в том числе иммуномодулирующим, противоопухолевым, антиоксидантным и адаптогенным.

«Олексин» содержит комплекс природных соединений фенольной природы (флавоноиды, кумарины, дубильные вещества, сапонины, фенолкарбоновые кислоты). Общее количество полифенольных (окисляемых) веществ в «Олексине» составляет не менее 4%. В последние два десятилетия природные полифенольные соединения привлекают всеобщее внимание исследователей не только как объект химического изучения, но и в качестве перспективных веществ для получения биологически активных препаратов и лекарственных средств. Об этом свидетельствует возросший за последние годы интерес к веществам данной группы как к источникам капилляроукрепляющих, противовоспалительных, желчегонных, антисклеротических, противо-опухолевых и других препаратов. Фенольным соединением называется вещество, содержащее в своей молекуле ароматическое (бензольное) кольцо, которое несет одну или более гидроксильных групп.

Образование фенольных соединений – одна из характерных особенностей растительной клетки. Широкое изучение фенольных соединений показало, что вещества данной группы обладают разносторонним действием на организмы животных и человека. Ранее других было обнаружено их действие на стенки кровеносных капилляров – Р-витаминоподобное действие. Другими важными свойствами ряда флавоноидов является их антиаггрегационная способность, противовоспалительное и жаропонижающее действие. Для ряда флавоноидных соединений показана антимикробная и противовирусная активность. Представители группы изофлавоноидов обладают эстрогенным действием. Флавоноиды могут выступать в качестве радиопротекторов и как радиопотенциирующие средства. Флавоноиды оказывают положительное влияние на метаболизм печени, усиливая желчеотделение и повышая детоксикационную функцию. Ряд соединений обладает мочегонным действием, другие - повышают тонус кишечника. Показана анаболизирующая активность некоторых флавоноидных соединений, сахароснижающие свойства, нейротропное, адаптогенное, антиатеросклеротическое действия. Противоопухолевая активность обнаружена у флавонов, флавонолов, лейкоантоцианидинов, катехинов и других представителей флавоноидов. В настоящее время антиоксидантной активности флавоноидов уделяется огромное внимание, как возможному механизму, через который реализуются биологические эффекты данной группы соединений. Имеется большое количество работ, указывающих на взаимосвязь адаптогенных, иммуномодулирующих, противоопухолевых и ряда других свойств фенолов с их антиоксидантной активностью. Широко известны такие растения, как солодка, календула, бессмертник, софора японская, зверобой, а также березовый гриб чага. Их лечебное действие объясняют присутствием в них веществ фенольной природы (флавоноидов, танинов, кумаринов и др.).

К растениям, содержащим вещества фенольной природы относится и персик. Целебные свойства этого растения известны с древних времен. Наиболее велика роль персика в древней китайской культуре, где он почитался как символ долголетия и ценился наряду с женьшенем, как тонизирующее и общеукрепляющее средство. Несомненный интерес вызывают материалы о применении экстрактов из плодов, листьев и цветков персикового дерева в медицине Древнего Китая, Кореи и Средней Азии.

1. Изучение иммуномодулирующих свойств БАД «Олексин»

1.1. Изучение влияния «Олексина» на первичный иммунный ответ.
1.1.1. Исследование влияния «Олексина» на количество форменных элементов белой крови и морфометрические показатели тимуса и селезенки мышей при первичном иммунном ответе.
Мышей иммунизировали внутрибрюшинно субоптимальной дозой корпускулярного антигена - 5106 эритроцитов барана в 0,5 мл изотонического раствора натрия хлорида. «Олексин» вводили один раз в сутки в течение 3-х дней перорально с помощью зонда в дозах 0,00125; 0,0025; 0,005; 0,01 и 0,02 мл/кг в 0,5 мл дистиллированной воды с иммунизацией антигеном через 1 час после последнего применения БАД. Контрольные животные получали по 0,5 мл дистиллированной воды по аналогичной схеме. Оценивали влияние БАД Олексин на массу и клеточность центральных (тимуса) и периферических (селезенки) органов иммунитета, а также на показатели белой крови мышей. На 5-е сутки после иммунизации мышей забивали путем декапитации, собирали кровь для анализа гемограммы, вскрывали, выделяли тимус и селезенку. Органы взвешивали на торсионных весах. Для оценки динамики изменения массы органа введён коэффициент, представляющий собой процентное отношение массы органа данного животного к массе его тела. Количество лейкоцитов периферической крови мышей, лейкоцитарную формулу и клеточность органов иммунной системы оценивали по общепринятым методикам.

Установлено, что «Олексин» в дозе 0,01 мл/кг достоверно повышает количество лейкоцитов периферической крови мышей. В этой дозе, а также в дозе 0,005 мл/кг «Олексин» увеличивал и количество лимфоцитов периферической крови. БАД ни в одной из испытанных доз не оказала существенного влияния на количество нейтрофилов, эозинофилов и моноцитов периферической крови мышей. Об этом свидетельствует отсутствие статистически достоверных отличий между показателями опытной и контрольной групп мышей. Как видно из таблицы, в двух наименьших дозах «Олексин» оказал статистически значимое, по сравнению с контролем, увеличение массы и клеточности тимуса и селезенки. В наибольшей из доз он повышал только количество кариоцитов селезенки.

1.1.2. Изучение влияния "Олексина" на клеточный иммунный ответ.
Опыты выполнены на нелинейных мышах-самцах массой 18-20 г. Мышей сенсибилизировали эритроцитами барана 2•107, которые вводили внутрибрюшинно в 0,5 мл изотонического раствора натрия хлорида. "Олексин" вводили трехкратно в дозах 0,00125; 0,0025; 0,005; 0,01 и 0,02 мл/кг в 0,5 мл дистиллированной воды. Введение эритроцитов барана осуществляли одновременно с последним введением препарата. Контрольные животные получали по 0,5 мл дистиллированной воды по такой же схеме, что и опытные. На пятые сутки вводили разрешающую дозу эритроцитов барана (1Ч108 клеток в 0,02 мл изотонического раствора натрия хлорида подкожно в подошвенную поверхность стопы задней лапы). В контрлатеральную лапу вводили в том же объеме растворитель (изотонический раствор натрия хлорида). Через 24 часа после разрешающей инъекции антигена оценивали выраженность иммунного воспаления по изменению толщины стопы.

Развитие реакции гиперчувствительности замедленного типа у мышей контрольной группы проявилось появлением через 24 часа после разрешающей инъекции антигена иммунного воспаления, выраженность которого составила 16,4 ± 0,73 %.

Введение "Олексина" в дозах 0,02; 0,01 и 0,00125 мл/кг приводило к угнетению развития реакции ГЗТ.

1.1.3. Влияние "Олексина" на гуморальный иммунный ответ.
Мышей иммунизировали внутрибрюшинно субоптимальной дозой корпускулярного антигена - 54106 эритроцитов барана в 0,5 мл изотонического раствора натрия хлорида. "Олексин" вводили один раз в сутки в течение 3-х дней перорально с помощью зонда в дозах 0,00125; 0,0025; 0,005; 0,01 и 0,02 мл/кг в 0,5 мл дистиллированной воды с иммунизацией антигеном через 1 час после последнего применения препарата. Контрольные животные получали по 0,5 мл дистиллированной воды по аналогичной схеме.
К 5-му дню первичного иммунного ответа у контрольных мышей происходило накопление антителообразующих клеток в селезенке, их число составило 123,1 ± 3,46 на 106 ЯСК или 13646±683 на орган. При определении титра специфических антител на 7-е сутки опыта было выявлено, что уровень гемагглютининов у контрольных мышей (в виде отрицательного log2 титра антител) был равен 9,25±0,16.
Иммуностимулирующий эффект БАД проявился в дозах 0,00125; 0,0025; 0,005 и 0,02 мл/кг, о чем свидетельствовало увеличение абсолютного количества АОК на орган. В дозах 0,0025 и 0,005 мл/кг число АОК было выше показателей контроля не только в абсолютном, но и в относительном выражении (на 106 ЯСК селезёнки). Титр гемагглютинирующих антител (по -log2 титра) на 7-е сутки достоверно повысился у животных, получавших "Олексин" в дозах 0,02 и 0,0025 мл/кг.
В дозе 0,01 мл/кг "Олексин" не влиял на гуморальный иммунный ответ.

1.2. Характеристика иммунотропной активности "Олексина" на модели индуцированной циклофосфамидом иммуносупрессии
В экспериментальной иммунопатологии для скрининга потенциальных иммуномодуляторов общепризнана модель иммунодефицита, индуцированного введением циклофосфамида (ЦФ).

Экспериментальный иммунодефицит моделировали введением мышам-самцам массой 18-20 г внутрибрюшинно 100 мг/кг циклофосфамида (ЦФ) однократно и трехкратно (в течение 3-х дней 1 раз в сутки). На модели однократного введения ЦФ проводили исследование влияния "Олексина" на массу и клеточность органов иммунитета (тимуса и селезенки), показатели гемограммы животных, титр гемагглютининов в сыворотке крови и число АОК на высоте первичного иммунного ответа к эритроцитам барана (по методикам описанным выше). "Олексин" вводили перорально 1 раз в сутки в течение 3-х дней в дозах 0,00125; 0,0025; 0,005; 0,01 и 0,02 мл/кг в 0,5 мл дистиллированной воды. Иммунизацию осуществляли одновременно с последним введением препарата. "Олексин" начинали вводить через сутки после введения ЦФ. Показатели опытных групп животных сравнивались с результатами оценки в двух контрольных группах мышей: контроль 1 - животные, получавшие по 0,5 мл дистиллированной; контроль 2 - получавшие ЦФ и по 0,5 мл дистиллированной воды.

У контрольных мышей, иммунизированных эритроцитами барана и не получавших циклофосфамид, на 5-е сутки первичного иммунного ответа количество лейкоцитов в крови составляло (х109/л) 6,8 ± 0,81, палочкоядерных нейтрофилов - 0,25±0,12, сегментоядерных нейтрофилов - 2,28 ± 0,36, эозинофилов - 0,04 ± 0,03, моноцитов - 0,23 ± 0,10, лимфоцитов 3,97±0,3. Однократное введение циклофосфамида животным за сутки до начала введения препарат (контроль 2) приводило к снижению общего количества лейкоцитов на 46,6 %, лимфоцитов на 60 %.

1.3. "Олексин" в дозах 0,02 и 0,005 мл/кг восстанавливал сниженное ЦФ количество лейкоцитов. Восстановление общего количества лейкоцитов, наблюдаемое при введении БАД в дозах 0,02 и 0,005 мл/кг, связано с увеличением количества лимфоцитов. В дозе 0,0025 мл/кг "Олексин" также восстанавливал сниженное ЦФ количество лимфоцитов.

Введение ЦФ приводило к снижению массы тимуса мышей на 24%, массы селезенки на 29 %, количества тимоцитов на 32%, количества спленоцитов на 31,8 % в сравнении с аналогичными показателями у животных, не получавших иммунодепрессант (контроль 1). Применение "Олексина" в дозе 0,00125 мл/кг устраняло дефект иммунитета, проявляющийся уменьшением количества тимоцитов и спленоцитов, о чем свидетельствует полное восстановление исследуемых показателей.

Введение ЦФ животным (контроль 2) вызывало угнетение накопления АОК в селезенке и уменьшение количества антител, образующихся к эритроцитам барана. "Олексин" нормализовал нарушенные ЦФ показатели. Нивелирование иммуносупрессирующего действия ЦФ проявилась увеличением под влиянием БАД в дозах 0,02, 0,01 и 0,00125 мл/кг уровня антителообразующих клеток в селезёнке и уровня гемагглютининов во все апробируемых дозах. При этом установлено, что наибольшие сдвиги в титре антител вызвало применение меньшей из использованных доз.

1.4. Изучение влияния "Олексина" на фагоцитарную активность макрофагов
1.4.1. Влияние "Олексина" на функцию перитонеальных макрофагов и макрофагов селезенки
На беспородных мышах-самцах массой 18-20 г изучено влияние "Олексина" на функциональную активность перитонеальных и селезеночных макрофагов в отношении микробных частиц инактивированного Staphylococcus aureus штамма 209Р. "Олексин" вводили однократно внутрижелудочно в дозах 0,001; 0,01 и 0,1 мл/кг. В качестве контроля использованы животные, которым вводили эквиобъемное количество дистиллированной воды.

Макрофаги выделяли по общепринятым методикам. Концентрацию клеток в полученных суспензиях доводили до 5х106/мл. Затем в культуру вносили частицы Staphylococcus aureus. О фагоцитарной функции макрофагов судили по изменению процента фагоцитоза и фагоцитарного числа.
Исследование фагоцитарной активности показало, что БАД активирует фагоцитоз Staphylococcus aureus штамма 209Р перитонеальными макрофагами мышей во всех исследованных дозах, что проявляется увеличением как процента фагоцитоза, так и фагоцитарного числа.
Введение "Олексина" во всех апробируемых дозах повышало количество макрофагов селезенки, участвующих в захвате микробных частиц Staphylococcus aureus (процент фагоцитоза). В наименьшей дозе (0,001 мл/кг) "Олексин" повышал и фагоцитарное число.

1.4.2. Влияние "Олексина" на функциональную активность макрофагов селезенки на фоне иммуносупрессии
Патологическое снижение активности макрофагов в организме может стать одним из главных звеньев в патогенезе вторичных иммунодефицитов. Поэтому представлялось целесообразным изучение влияния "Олексина" на фагоцитарную активность макрофагов в модели лекарственной (циклофосфамидиндуцированной) иммуносупрессии. "Олексин" во всех апробируемых дозах оказал стимулирующее воздействие на фагоцитарную активность макрофагов селезенки, сниженную однократным введением циклофосфамида в дозе 100 мг/кг за сутки до введения препарата. При этом необходимо отметить, что наибольшую эффективность проявила наименьшая доза.

1.5. Характеристика влияния "Олексина" на иммунную систему мышей, подвергнутых иммобилизационному стрессу
Для изучения биологического действия "Олексина" на иммунную систему животных, подвергнутых стрессу, осуществляли 9-часовую иммобилизацию мышей-самцов массой 18-20 г в пластмассовых клетках в положении на спине. "Олексин" вводили перорально один раз в сутки в течение 3-х дней в дозах 0,00125; 0,005 и 0,02 мл/кг в 0,5 мл дистиллированной воды. Контрольные животные, подвергавшиеся иммобилизации (контроль 2), получали по 0,5 мл дистиллированной воды по той же схеме.
Для анализа выраженности стрессорной реакции использовали дополнительный контроль - животные, получавшие в течение 3-х суток дистиллированную воду, но не подвергавшиеся иммобилизации (контроль 1). Оценивали влияние БАД in vivo на клеточность и/или массу центральных (тимуса, костного мозга) и периферических (селезенки, паховых лимфатических узлов) органов иммунитета, на показатели гемограммы, а также на фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови и макрофагов селезенки, костного мозга и лимфатических узлов. Животных забивали декапитацией, собирая кровь для определения количества эритроцитов и лейкоцитов, изучения нейтрофильного фагоцитоза формализированных эритроцитов барана (ФЭБ). Количество эритроцитов, лейкоцитов периферической крови мышей и лейкоцитарную формулу оценивали по общепринятой методике. Выделение органов, определение их массы и весового коэффициента проводили по вышеописанной методике. Влияние препарата на фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови оценивали по модифицированному методу В.Н. Каплина (1993).

Для изучения влияния препарата на фагоцитарную активность нейтрофилов к 0,025 мл гепаринизированной крови добавляли 0,0125 мл ФЭБ в концентрации 200.106/мл , 0,0125 мл полной питательной среды (ППС) с НЕРЕS, встряхивали и инкубировали в течение 30 минут при +37°С. Далее готовили мазки по вышеописанной схеме. Фагоцитарную активность клеток анализировали по проценту фагоцитоза, фагоцитарному числу, фагоцитарному индексу (количество объектов фагоцитоза, которое приходится на одну фагоцитирующую клетку). Рассчитывали также абсолютное количество участвующих в фагоцитозе нейтрофилов крови, исходя из абсолютного числа нейтрофилов и процента фагоцитоза, и абсолютное число объектов фагоцитоза (фагоцитарное число, умноженное на абсолютное количество нейтрофилов). Помимо этого, проведена оценка показателей фагоцитоза в клеточных суспензиях органов лимфомиелоидного комплекса по методу Ю.И.Шилова и С.В. Гейна (1998). Показатели фагоцитоза, учитывая сложности идентификации нефагоцитирующих макрофагов и их дифференциации от дендритных и других сходных по морфологии клеток, рассчитывали по отношению ко всем ядросодержащим клеткам клеточных суспензий.

1.5.1 Влияние "Олексина" на гемограмму и морфометрические показатели органов лимфомиелоидной системы мышей, подвергнутых иммобилизационному стрессу
Изучение относительных показателей периферической крови животных, подвергнутых иммобилизации (контроль 2), выявило характерные для стресса изменения в структуре лейкоцитарной формулы: уменьшение лимфоцитов и эозинофилов и увеличение сегментоядерных нейтрофилов. Снижение количества эозинофилов и увеличение количества сегментоядерных нейтрофилов в периферической крови данной группы животных присутствовало и в абсолютных цифрах. "Олексин" практически не влиял на показатели белой крови, за исключением некоторого снижения количества палочкоядерных нейтрофилов при применении препарата в дозе 0,005 мл/кг. У контрольных и опытных групп животных отсутствовала существенная разница в количестве эритроцитов.

Иммобилизация животных вызывала существенное изменение морфометрических показателей органов иммунной системы. У мышей, подвергнутых стрессу (контроль 2), происходило уменьшение массы и клеточности тимуса, селезенки и лимфатических узлов. Влияние стресса на клеточность костного мозга носило противоположный характер и проявлялось увеличением количества кариоцитов. Применение "Олексина" в наибольшей дозе (0,02 мл/кг) приводило к восстановлению измененных морфометрических показателей тимуса, костного мозга, селезенки, лимфатических узлов. При введении "Олексина" в дозе 0,00125 мл/кг происходило увеличение числа клеток тимуса сниженного стрессом.

Влияние "Олексина" на массу и клеточность тимуса, селезенки, периферических лимфатических узлов (паховых) и клеточность костного мозга на фоне иммобилизационного стресса (n=10 в каждой группе)

1.5.2 Влияние "Олексина" на фагоцитарную активность нейтрофилов периферической крови мышей, подвергнутых иммобилизационному стрессу
Иммобилизация приводила к снижению фагоцитарной активности нейтрофилов периферической крови в отношении формалинизированных эритроцитов барана (ФЭБ), что проявлялось уменьшением всех исследуемых относительных показателей фагоцитоза. При этом не отмечено статистически достоверных изменений абсолютного количества фагоцитирующих клеток. Это связано с компенсаторным увеличением общего число нейтрофилов в периферической крови. Тем не менее, по другому интегральному показателю - общему количеству захваченных клетками объектов на 1 л крови - выявлено статистически значимое угнетение нейтрофильного фагоцитоза.

В наибольшей из апробированных доз (0,02 мл/кг) "Олексин" вызвал недостоверное повышение относительных показателей фагоцитоза и достоверно увеличивал

1.5.3 Влияние "Олексина" на фагоцитарную активность макрофагов органов лимфомиелоидной системы мышей, подвергнутых иммобилизационному стрессу
Исследование воздействия стресса на фагоцитарную активность клеток селезенки и костного мозга также выявило достоверные изменения фагоцитарной активности клеток данных органов по абсолютным показателям - соответственно снижение и увеличение. "Олексин" в дозах 0,02 и 0,005 мл/кг повышал количество фагоцитирующих клеток селезенки и общее количество захваченных клетками объектов фагоцитоза, а абсолютное число фагоцитирующих клеток костного мозга и общее количество захваченных ими объектов уменьшал до уровня показателей контроля 1, проявляя выраженное антистрессорное действие.
Изучение фагоцитарной активности макрофагов лимфатических узлов не выявило различий между изучаемыми показателями как в контрольных, так и в опытных группах.

У мышей, подвергнутых иммобилизации, происходило увеличение абсолютных показателей фагоцитарной активности клеток костного мозга в сравнении с контрольной группой животных, при этом существенных различий относительных показателей не было. На фоне применения "Олексина" в дозе 0,02 мл/кг абсолютное число фагоцитирующих клеток и общее количество захваченных объектов фагоцитоза устанавливалось на уровне контрольной группы животных. В данной дозе, а также в дозе 0,005 мл/кг наблюдалось уменьшение относительных показателей фагоцитоза по сравнению с показателями животных из группы контроль 2 (стресс).

"Олексин" при профилактическом применении в дозе 0,02 мл/кг оказал выраженное антистрессорное действие, препятствуя изменению клеточности органов лимфомиелоидного комлекса и восстанавливая абсолютные показатели фагоцитарной активности нейтрофилов и фагоцитов селезенки. Помимо этого препарат препятствовал стрессорной активации абсолютных показателей фагоцитоза в костном мозге.
Таким образом, исследование иммунотропности "Олексина" показало, что он обладает выраженной иммунодулирующей активностью: стимулирует накопление АОК в селезенке, повышает титр антител к эритроцитам барана, угнетает развитие реакции гиперчувствительности замедленного типа, повышает фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов и макрофагов селезенки.

"Олексин" в экспериментальной модели иммунодефицита, вызванного циклофосфамидом, восстанавливает активность макрофагов селезенки, стимулирует накопление АОК, повышение титра антител и количество Т-лимфоцитов селезенки, препятствует снижению клеточности органов иммунной системы, увеличивает количество Т-лимфоцитов селезенки, т.е. способствует восстановлению гуморального и клеточного звеньев иммунной системы.

"Олексин" в экспериментальной модели иммунодефицита, вызванного иммобилизационным стрессом, предупреждает изменения клеточности тимуса, селезенки, лимфатических узлов, костного мозга и фагоцитарной активности макрофагов селезенки, костного мозга и нейтрофилов периферической крови.

2. Исследование адаптогенной активности БАД "Олексин"

В данном разделе проведена оценка адаптогенных свойств БАД "Олексина" по его влиянию на показатели неспецифической резистентности и реактивности организма, а также некоторые интегральные функции центральной нервной системы (мышечную и силовую выносливость, эмоциональную и исследовательскую активность животных, болевую чувствительность).

2.1 Исследование действия "Олексина" на функциональное состояние двигательного анализатора
Исследование действия "Олексина" на функциональное состояние двигательного анализатора проводилось в тестах влияния "Олексина" на мышечную и силовую выносливость, пробе с поднятием грузиков.
Влияние БАД "Олексин" на мышечную выносливость изучено в тесте плавания (по Рыловой М.Л.) на мышах весом 20-22 г обоего пола, которые предварительно в течение 3 суток получали "Олексин" перорально с помощью зонда в дозах 0,0025 и 0,01 мл/кг 1 раз в сутки. Тесты проводились через 1 час после последнего введения препарата. Контрольные животные получали то же самое количество дистиллированной воды. Для проведения теста использовали емкость с водой (столб воды 17-18 см, температура 21±0,5 С). Каждое животное получало нагрузку, равную 5% от массы тела (груз прикрепляли у основания хвоста). Учитывали время плавания до первого погружения.

Влияние БАД "Олексин" на силовую выносливость изучено в тесте подвисания на мышах весом 20-22 г обоего пола, которые предварительно в течение 3 дней получали "Олексин" по схеме, изложенной выше (см. мышечную выносливость). Животные удерживались передними лапами на горизонтальной проволоке. Учитывалось время удержания.

Изучение влияния БАД на мышечную устойчивость проводили на мышах в пробе с поднятием грузиков. К пластине, представляющей собой мелкую металлическую сетку весом 19 г, присоединяли цепь из грузиков заданной массы. Мышь, после захвата ею пластины, поднимали за хвост вверх и учитывали количество и массу поднятых грузиков. Затем вычисляли процентное отношение удержанного веса к массе животного. "Олексин" вводили в трех дозах 0,0025; 0,01 и 0,02 мл/кг 1 раз в сутки в течение 3-х дней.
Изучение воздействия "Олексина" на опытных животных в тестах на мышечную (плавание) и силовую (подвисания на горизонтальной проволоке) выносливость, в пробе с поднятием грузиков выявило способность БАД повышать устойчивость животных к физическим нагрузкам.

2.2 Влияние "Олексина" на болевую чувствительность
Влияние "Олексина" на болевую чувствительность изучено на 30 мышах весом 20-22 г обоего пола, получавших БАД трехкратно по схеме, аналогичной представленной в тесте на мышечную выносливость. Животных помещали на металлическую поверхность нагретую до 65±0,5С, с ограничительным цилиндром диаметром 15 см и высотой 17 см. Учитывали время до первого облизывания лапок (латентный период) и запрыгивания на край цилиндра.

Латентный период (до первого облизывания задних лапок) у контрольной группы мышей составила 19,2±2,7 сек, общая продолжительность пребывания на нагретой поверхности (до запрыгивания на край ограничительного цилиндра) - 208,0±16,0 сек.

В таблице показано, что введение "Олексина" в дозе 0,0025 мл/кг увеличивало продолжительность латентного периода. В обеих апробируемых дозах "Олексин"" повышал порог болевой чувствительности, что проявилось в увеличении общей продолжительности нахождения животных опытных групп на нагретой поверхности.

2.3 Изучение влияния "Олексина" на поведенческие реакции
Влияние БАД на поведенческие реакции оценивали в тесте "открытое поле" на мышах весом 18-20 г обоего пола, которые получали "Олексин" в дозах 0,00125; 0,0025; 0,005; 0,01 и 0,02 мл/кг перорально по схеме 1 раз в сутки в течение 3-х дней. Исследования проводили через 24 часа после последнего введения препарата.

Продолжительность теста 3 минуты. Животных помещали в центр площадки, разбитой на квадраты. Регистрировали время до первого посещения темного отсека ("норки") (латентный период), число стоек и обследованных окон (реакция оглядывания), число посещаемых квадратов (двигательная активность), число умываний (грумминг), число актов дефекации и уринации (эмоциональность, вегетативные реакции), количество посещений "норки", время нахождения в "норке".

Влияние "Олексина" на сниженную введением эритроцитов барана функциональную активность нервной системы изучено на белых беспородных мышах обоего пола массой 18-20 г в тесте "открытое поле" по представленным выше показателям. "Олексин" вводили перорально в течение 3-х дней 1 раз в сутки в дозах 0,00125; 0,0025; 0,005; 0,01 и 0,02 мл/кг в 0,5 мл дистиллированной воды. Эритроциты барана вводили внутрибрюшинно в субоптимальной дозе (5х106) в 0,5 мл изотонического раствора натрия хлорида через 1 час после последнего введения препарата. Для анализа выраженности влияния иммунизации эритроцитами барана на поведенческие реакции мышей использовали две контрольные группы животных: контроль 1 - мыши, получавшие в течение 3-х суток по 0,5 мл дистиллированной воды, но не подвергавшиеся иммунизации; контроль 2 - мыши, получавшие в течение 3-х суток по 0,5 мл дистиллированной воды с последующей иммунизацией антигеном. Тесты проводили через 24 часа после введения антигена.

При изучение влияния "Олексина" на поведенческие реакции (тест "открытое поле") в качестве препарата сравнения использовали экстракт родиолы розовой, обладающий стимулирующими свойствами в дозе 0,05 мл/кг, который вводили перорально через зонд по таким же схемам, что и олексин.

Изучение поведенческих реакций контрольной группы мышей в тесте "открытое поле" показали, что среднее количество посещенных полей составляет 17,1±0,41, горизонтальных стоек - 22,0±0,66, исследованных отверстий - 5,5±0,29, латентный период до первого посещения темного отсека - 23,5±1,6 сек, количество посещений темного отсека - 3,3±0,08, общая продолжительность нахождения в темном отсеке - 78,5±3,11 сек.
Исследования показали, что экстракт родиолы розовой жидкий в дозе 0,05 мл/кг и "Олексин" в дозах 0,02, 0,005 и 0,0025 мл/кг стимулировали двигательную активность и ориентировочно-исследовательские реакции животных. Эффекты "Олексина" при применении его в дозе 0,0025 мл/кг находились на одном уровне с эффектами родиолы розовой, являющейся признанным стимулирующим средством.

Исследуемые показатели при введении "Олексина" в дозах 0,01 и 0,00125 мл/кг находились на уровне контроля. Данные по влиянию препаратов на эмоциональность не приводятся в связи с отсутствием значимых различий между животными опытных и контрольной групп и группы сравнения.

Введение мышам субоптимальной дозы эритроцитов барана через сутки вызывало у животных (контроль 2) угнетение двигательной активности и ориентировочно исследовательских реакций, по сравнению с не иммунизированными мышами (контроль 1), что проявилось уменьшением количества обследованных полей на 40 %, горизонтальных стоек на 20 %, исследованных отверстий на 41,5 %, количества посещений темного отсека на 21 %, латентного периода до первого посещения темного отсека на 55,5 % и увеличением общей продолжительность нахождения в темном отсеке на 45 %.

В данном тесте различий в опытных и контрольных группах по показателю эмоциональности не наблюдалось, поэтому эти данные не приводятся.
В дозах 0,02, 0,005, 0,0025 и 0,00125 мл/кг "Олексин" вызывал стимуляцию ориентировочно-исследовательских реакций, превосходя по активности экстракт родиолы розовой. Укорочение латентного периода до первого посещения темного отсека у мышей второй контрольной группы, по-видимому, выступает в качестве патологической активности, вызванной центральным действием провоспалительных цитокинов, уровень которых повышается на фоне большинства форм иммунного ответа, что подтверждается уменьшением количества посещений темного отсека и существенным увеличением продолжительности пребывания в нем. В этом случае удлинение латентного периода при введении БАД "Олексин" и экстракта родиолы носит адаптогенный характер. Наиболее выраженная активность "Олексина" проявилась при применении его в наименьшей дозе (0,00125 мл/кг), в которой препарат при введении животным на обычном фоне не вызывал стимуляции поведенческих реакций.

Таким образом, в исследованных моделях "Олексин" проявил себя как препарат, сходный по биологической активности с классическими адаптогенами. По ряду показателей он оказался более эффективным, чем эталонный препарат сравнения - экстракт родиолы розовой.

3. Изучение антиоксидантной и противоопухолевой активностей БАД "Олексин"

3.1. Оценка антиоксидантной активности БАД "Олексин" in vitro
Для исследования антиоксидантных свойств "Олексина" был применен фотохемилюминесцентный метод, моделирующий окисление триптофансодержащих белков и влияние веществ на этот процесс. В качестве соединения, моделирующего белок, использован пептид глицилтриптофан фирмы Sigma. Для сенсибилизации окисления по радикальному пути (активные частицы - пероксидные радикалы RO2., супероксид O2.) использовали рибофлавин (НПО "Витамин"). Остальные реактивы "химически чистые". Буферный раствор, содержащий 0,1 М Gly-Trp, 2 мкМ рибофлавина и испытуемый препарат, облучали монохроматическим светом с l=436 нм. Концентрацию препарата подбирали экспериментально. Через 60 сек после облучения раствор перекачали в кювету высокочувствительной фотометрической установки и регистрировали интенсивность хемилюминисценции. В качестве характеристики антиоксидантной активности использовали величину с1/2 - концентрация 50%-ного ингибирования, при которой интенсивность хемилюминисценции снижается в 2 раза (чем меньше данная величина, тем эффективней препарат), а также обратная величина - 1/с1/2, показатель определяющий предельное разбавление препарата, при котором сохраняется антиоксидантная активность. Антиоксидантное действие препарата сравнивалось с таковым стандартного образца рутина.

Изучение антиоксидантных свойств "Олексина" проведено при участии сотрудников лаборатории химической биофизики ИБХФ РАН (Москва) Лозовской Е.Л. и Макареевой Е.Н.
Результаты проведенных исследований, свидетельствуют о том, что "Олексин" является эффективным антиоксидантом - добавление БАД в модельную систему вызывает снижение скорости окисления глицилтриптофана и, соответственно, приводит к уменьшению регистрируемой интенсивности хемилюминисценции. Сравнение с антиоксидантным действием, проявляемым экстрактами и настойками известных лекарственных растений, показывает, что "Олексин" превосходит по своей активности большинство из них и проявляет антиоксидантную активность такого же порядка, как экстракт родиолы розовой (рис.).

3.2. Оценка противоопухолевой активности БАД "Олексин"
Оценка противоопухолевой активности "Олексина" проведена по программе скрининга на противоопухолевую активность по методике, рекомендованной ФК России и принятой в онкологическом научном центре РАМН. В опытах были использованы следующие опухолевые штаммы перевиваемых опухолей мышей:
- аденокарцинома молочной железы Са-755, которую прививали мышам-самкам линии С57 ВL6 ;
- эпидермоидная карцинома легкого Льюис, которую прививали мышам-самкам линии С57 ВL6;
- меланома В-16, которую прививали мышам-самкам линии С57 ВL6.

Изучение профилактического противоопухолевого действия "Олексина" проведено на линейных мышах, которым вводили олексин в течение 10 дней в разовых дозах 1 мг/кг и 10 мг/кг (курсовая 10 мг/кг и 100 мг/кг соответственно). Через сутки после окончания курса введения препарата мышам прививали аденокарциному молочной железы Са-755 в прививочной дозе 30 мг/мышь. О наличии профилактического противоопухолевого действия препарата судили по снижению прививаемости и задержке роста опухоли.

Исследования проводились c участием руководителя группы изучения природных веществ онкологического научного центра РАМН с.н.с., к.м.н. Е.М. Трещалиной и н.с. группы, к.м.н. Н.В.Андроновой (г.Москва).
"Олексин" по результатам скрининга отобран как потенциальное средство профилактики рака.

При пероральном применении "Олексина" в минимальной разовой дозе 1 мг/кг 10 кратным курсом (курсовая доза 10мг/кг) на Са -755 получено торможение роста опухоли (ТРО) - 81%. Однако в повторном опыте выраженность эффекта была меньше, ТРО составило 31%. При этом же курсе введения "Олексина" в отношении этой же опухоли наблюдалось и увеличение продолжительности жизни животных (УПЖ) на 42%, которое также не воспроизводилось в повторном опыте. Во всех других случаях при применении препарата во всем диапазоне изученных доз и при двух путях введения не отмечено значимого ТРО и УПЖ.
"Олексин" проявил противоопухолевое профилактическое действие. В прямой зависимости от величины примененной дозы "Олексин" вызывает статистически значимую задержку роста опухоли на 59-73 % и продление жизни мышей на 31-35%, и приводит к снижению прививаемости опухоли: из 8 мышей в каждой группе 1-2 мыши оказались без опухоли.

Примечание.
*-отличие с контролем достоверно (р<0,05);
**-в контрольной группе опухоли развивались у всех мышей.

Таким образом, БАД "Олексин" обладает ярко выраженным антиоксидантным действием и проявляет противоопухолевую активность в отношении аденокарциномы молочной железы Са-755 при применении ее в течение 10 дней до прививки опухоли.

Заключение.

Исследование иммунобиологической активности БАД "Олексин" показывает:

1. "Олексин" обладает выраженной иммунодулирующей активностью. Он стимулирует накопление АОК в селезенке, повышает титр антител к эритроцитам барана, угнетает развитие реакции гиперчувствительности замедленного типа, повышает фагоцитарную активность перитонеальных макрофагов и макрофагов селезенки.

2. "Олексин" в экспериментальной модели иммунодефицита, вызванного циклофосфамидом, восстанавливает активность макрофагов селезенки, стимулирует накопление АОК, повышение титра антител и количество Т-лимфоцитов селезенки, препятствует снижению клеточности органов иммунной системы, увеличивает количество Т-лимфоцитов селезенки, т.е. способствует восстановлению гуморального и клеточного звеньев иммунной системы.

3. "Олексин" в экспериментальной модели иммунодефицита, вызванного иммобилизационным стрессом, предупреждает изменения клеточности тимуса, селезенки, лимфатических узлов, костного мозга и фагоцитарной активности макрофагов селезенки, костного мозга и нейтрофилов периферической крови.

4. "Олексин" обладает адаптогенными свойствами. Он повышает мышечную и силовую выносливость, двигательную и ориентировочную активность, а также порог болевой чувствительности.

5. "Олексин" обладает ярко выраженным антиоксидантным действием и проявляет противоопухолевую активность в отношении аденокарциномы молочной железы Са-755 при введении в течение 10 дней до прививки опухоли.